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更新时间：2025-01-16 
浏览次数：17土壤酸性木聚糖酶（Soil Acidic Xylanase，S-ACX）测定
试剂盒说明书
分光光度法 50 管/24 样
木聚糖酶(EC 3.2.1.8)主要由微生物产生，能催化水解木聚糖，也被称为戊聚糖酶或半纤维素酶，可分解酿造或饲料工业中的原料细胞壁以及β-葡聚糖，降低酿造中物料的粘度，促进有效物质的释放，以及降低饲料中的非淀粉多糖，促进营养物质的吸收利用，因而广泛的应用于酿造和饲料工业中，ACX 一般分离自耐酸的真菌，细菌及部分霉菌。
ACX 在酸性环境下能将木聚糖降解成还原性寡糖和单糖，进一步在沸水浴条件下与 3,5-二硝基水杨酸发生显色反应，在 540nm 处有特征吸收峰，反应液颜色的深浅与酶解产生的还原糖量成正比，通过测定反应液在 540nm 吸光值增加速率，可计算ACX 活力。
产品名称 | BO6088-50T/24S | Storage |
缓冲液：液体 | 20ml | 4℃ |
试剂一：液体 | 5ml | 4℃避光 |
试剂二：液体 | 25ml | 4℃避光 |
说明书 | 一份 | |
试剂三：粉剂×1 瓶，-20 ℃保存，用时加入 4ml 蒸馏水，混匀，用不完的试剂 4℃保存一周；试剂四：粉剂×1 瓶，4 ℃保存，用时加入 4ml 蒸馏水，混匀，用不完的试剂 4℃保存一周；自备仪器和用品：
天平、常温离心机、震荡仪、恒温水浴锅，可见分光光度计、1 ml 玻璃比色皿。
新鲜土样风干，过 30-50 目筛。
对照管 | 测定管 | |||
土样（g） | 0.1 | 0.1 | ||
缓冲液（μl） | 600 | 400 | ||
试剂一（μl） | 200 | |||
混匀，50℃震荡反应 30min，立即 90℃水浴 10min，8000g，25℃离心 10min，取上清 500μl | ||||
试剂二（μl） | 500 | 500 | ||
混匀，90℃水浴中显色 5min，1ml 玻璃比色皿，对照管调零，测定A540。 | ||||
S-ACX 计算公式：
标准曲线：y = 2.5554x - 0.002 ，R2 = 0.9983
酶活定义：50℃，pH4.8 条件下，每克土壤每天分解木聚糖产生 1μmol 还原糖所需的酶量为一个酶活单位。
S-ACX 活力（μmol/d/g 土样）=（A540+0.002）÷ 2.5554×V 反总×103÷ W÷T÷ 150
= 75.14×（A540+0.002）÷ W
V 反总：反应总体积，0.6ml；T：反应时间，1/48d；1000：1mmol/L =103μmol/L；150：木糖分子量。
1. 保证震荡反应 30min，使酶与底物充分接触。
2. 注意 90℃水浴防止爆开，以免改变反应体系。
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