土壤β-木糖苷酶（Solid-β- xylosidase, S-β-XYS）测定试剂盒说明书

更新时间：2025-01-13

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土壤β-木糖苷酶（Solid-β- xylosidase, S-β-XYS）测定试剂盒说明书

分光光度法 50 管/24 样

正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定测定意义：

β-木糖苷酶(EC3.2.1.37)存在于植物、细菌和真菌等生物体，是催化木聚糖类半纤维素降解的关键酶，产物木糖可作为碳源应用于微生物发酵。另外，β-木糖苷酶还可以作为生物漂白剂应用于造纸工业，比传统的漂白法环保，具有广泛的应用价值。

S-β-XYS 催化对硝基苯酚-β-D-木糖苷产生对硝基苯酚，对硝基苯酚在 405nm 处有特征吸收峰，测定405nm 光吸收增加速率，可计算S-β-XYS 活性。

自备仪器和用品：

天平、低温离心机、可见分光光度计、1 ml 玻璃比色皿和蒸馏水。

约 0.1g 鲜土或风干土样，加入 1ml 提取液进行冰浴匀浆，室温振荡提取 30min，然后 10000g，4℃，离心 10min，取上清待测。

1、分光光度计预热 30min，调节波长至 405nm。

2、操作表

	对照管	测定管
样本（μl）	200	200

试剂一（μl）		50
试剂二（μl）	400	350
混匀，45℃水浴 20min
试剂三（μl）	400	400
混匀，静置 5min，405nm 处测定吸光值A，计算ΔA=A 测定管-A 对照管。每个测定管设一个对照管。

标准曲线：y=13.226x+0.0011，R²=0.9998；x 为标准品浓度（μmol/ml），y 为吸光值ΔA。酶活定义：每克土样每天催化产生 1μmol 对硝基苯酚的酶量为一个酶活单位。

β-木糖苷酶活性（μmol/d /g 土样）=(ΔA-0.0011) ÷13.226×V 反总÷(V 样÷V 样总×W)÷T

=16.33×(ΔA-0.0011)÷W

V 样总：加入提取液体积，1ml； V 反总：反应总体积，0.6ml；V 样：反应中样品体积，0.2ml； W：样品质量，g；T：反应时间，20min=1/72d；

ΔA 控制在 0.01-2 范围内，若ΔA 大于 2，可适当减小样本量。标准曲线线性范围为：0.01μmol/ml-0.5μmol/ml。